|
||
|
|
| Количественный метод регистрации воспалительных реакций организма |
| 21.08.11 12:31 |
|
Принципиальной особенностью нашей разработки является то, что выработанная процедура весьма устойчива к вариации большинства входящих в нее параметров. Так реакция не зависит от увеличения времени инкубации свыше 1 чаа. Она не зависит также от увеличения выше приведенных значений концентраций использованного красителя и индуктора. Это и ряд других моментов приводит к тому, что реакция не подвержена иным изменениям кроме изменений, связанных с наличием воспалительных реакций в организме. Это означает, что здоровые доноры дают всегда однотипную картину, на фоне которой легко видны отклонения, связанные с воспалительной реакцией. Проведенные на сегодняшний день, исследования показали, что методика может найти применение для решения следующих медицинских проблем: контроль за течением воспалительных процессов, возникающих после различных хирургических вмешательств, регистрации появления и течения аутоиммунных процессов при постинфекционных осложнениях, в частности при неврологических и сердечных осложнениях после дифтерии, мониторинг хронического воспаления при ревматоидных артритах и миостениях, регистрация воспалительной реакции при бронхиальной астме, отслеживание развития воспалительных событий при инфарктах миокарда, регистрация воспалений при васкулитах, системной красной волчанке, гепатитах, перитонитах, гнойных аппендицитах, воспалениях легких.. Несомненно, круг возможных приложений может быть существенно расширен. СУТЬ МЕТОДА: В образцы периферической крови (0,2-0,5 мл), содержащие гепарин в качестве антикоагулянта (30 единиц на мл), добавляется регистрирующий краситель – (100 мкг на мл), который при окислении легко превращается во флуоресцентный краситель. Одновременно добавляется индуктор окислительного взрыва. В результате начинается продукция нейтрофилами активных форм кислорода и окисление красителя. Процесс окрашивания длится 1 час. Получившийся в результате флуоресцентный краситель связывается с ДНК внутри клеток, в результате чего они начинают флуоресцировать в красной области спектра при освещении ультрафиолетовым или зеленым светом. Эта флуоресценция отдельных клеток, которая пропорциональна способности клетки производить активные формы кислорода, может быть точно и быстро измерена с помощью проточного цитофлуориметра. Скорость измерения 10 тыс. клеток в минуту. Среднее время измерения одного образца 2 мин. Общее время анализа, включая взятие крови и приготовление образца 2 часа. При этом один оператор может параллельно анализировать 10-20 образцов, так что общая производительность может составить 10-20 образцов за 2 часа. Обмен тематическими статьями для раскрутки проектов под Rambler |
Таинственные силы кордицепса
Стоп РакКоличественный метод регистрации воспалительных реакций организмаCopyrigiht © 2009-2011 | ||||||||