Вопросы и ответы
Пищевая ценность продуктов питания
Использование местных пищевых растительных Лекарственные растения широколиственных лесов равнинной и горной тайги, полупустынь и пустынь Бадан толстолистный,...
Использование местных пищевых растительных Лекарственные растения широколиственных лесов равнинной и горной тайги, полупустынь и пустынь Бадан толстолистный,...
Spa-бассейн — приятное решение проблем здоровья
Многие люди в наши дни отдают своё предпочтение spa-бассейну. Такого вида бассейн чем-то отличается от того, к которому мы привыкли, обычного, но вот чем? Все знают, ...
Многие люди в наши дни отдают своё предпочтение spa-бассейну. Такого вида бассейн чем-то отличается от того, к которому мы привыкли, обычного, но вот чем? Все знают, ...
О том, почему я решила оформить гражданство Эстонии
Для того чтобы захотеть оформить гражданство Эстонии, нужно просто единожды приехать в эту удивительную страну. К тому же, получив гражданство Эстонии, вы станет...
Для того чтобы захотеть оформить гражданство Эстонии, нужно просто единожды приехать в эту удивительную страну. К тому же, получив гражданство Эстонии, вы станет...
Календарь
Опрос
Ваше отношение к новым методам лечения
Самое интересное
|
||
|
|
WSS-Consilting сделает работу с документацией проще
Ни на одном предприятии и ни в одной организации избежать работы с документацией невозможно. Да и не нужно её избегать – нужно сделать так, чтобы работа с ней не так…
Отличительные черты врачей психиатров и психотерапевтов
Когда требуется совет профессионала или необходима помощь, чтобы разобраться в собственных мыслях, отношениях в семье (обществе, самому себе), возникает резонный вопрос – к кому обратиться? Кто является тем специалистом, помощь…
| Иммунотерапия с использоваием дендритных клеток |
| 03.09.11 12:37 |
 Перед каждым раундом лечения производят забор 40-60 мл периферической крови больного в шприц, содержащий раствор гепарина из расчета 30 Ед/мл. Кровь должна поступать на обработку не позднее 48 часов после забора. Из взятой крови выделяют моноциты, которые культивируются в течение 4 дней в среде RPMI1640 c добавлением 10% человеческой сыворотки, аутологичной или полученной от доноров с 4й группой крови. Выделение осуществляется путем получения смеси моноцитов и лимфоцитов центрифугированием на ступенчатом градиенте фикол – урографина (плотность раствора 1,077 г на мл) с последующим прикреплением моноцитов к поверхности культуральных флаконов. Для индукции созревания дендритных клеток в среду добавляются ростовые факторы: гранулоцит-макрофаг колоний-стимулирующий фактор, 3000 ед./мл, (могут быть использованы фармакологический препарат «Лейкомакс» или «Сарграмостим») и интерлейкин-4 – 500 ед./мл (IL4). На 4 день к дендритным клеткам добавляют соответствующий антиген. В случае герпетической инфекции это стандартная коммерческая противогерпетическая вакцина, в случае туберкулеза – БЦЖ вакцина, в случае гепатита С – вирусный белок NS3, полученный генно-инженерным путем. В этот же день для дополнительного усиления захвата дендритными клетками антигенный материал вводят внутрь полученных дендритных клеток с помощью электрического разряда (электропорация). Для индукции полного созревания дендритных клеток после добавления антигена к ним добавляется кондиционированная среда, полученная от культивировния аутологичных мононуклеаров, либо фактор некроза опухолей – альфа (1000 ед. на мл), либо следовые количества бактериального липополисахарида (0,2 микрограмма на мл) Подтверждением получения, в результате приготовления, истинных дендритных клеток служили следующие критерии:1) рост в неприкрепленном к субстрату состоянии (в отличие от макрофагов, которые плотно прикрепляются к субстрату) 2) наличие характерной морфологии дендритных клеток, несущих множественные отростки. 3) появление значительного количества поверхностных маркеров свойственных дендритным клеткам (HLA-DR, HLA-ABC, CD80, CD83). Определяется с помощью флуоресцентного микроскопа или техники проточной цитофлуорометрии. См. гистограммы в конце текста. Параллельно с приготовлением дендритных клеток, приготавливаются активированные лимфоциты, полученные из той же порции крови. Для этого из 20 мл крови с помощью центрифугирования в градиенте плотности выделяются мононуклеарные лейкоциты. Они активируются к пролиферации с помощью фитогемагглютинина (20 микрограмм на мл), как при стандартной реакции бласт – трансформации лимфоцитов. Цель процедуры активировать возможно большего числа Т-лимфоцитов при преимущественной стимуляции Th1-клеточного пути иммунного ответа. Одновременно измеряется доля активированных клеток, т.е. оценивается способность лимфоцитов данного больного отвечать на митогенные стимулы. Точное измерение осуществляется методом проточной цитофлуориметрии (Kroll W., 1984, Kubbies M. et al, 1985.), приближенное по включению меченного тритием тимидина. Введение вакцины пациенту На 3-5 сутки больному паравертебрально в межлопаточной области вводят внутрикожно дендритные клетки, нагруженные опухолевыми антигенами в количестве 5х105-107 и активированные лимфоциты в количестве 107. Объем вводимой суспензии составляет 3 мл. Введение осуществляется внутрикожно в виде "лимонной корочки" в 2 или 3 точки на спине. Курс лечения занимает 5 недель, и включает в себя 5 инъекций. Курс лечения повторяется при необходимости. Реакции при проведении иммунотерапии: - гиперемия кожи в местах инъекций дендритных клеток и активированных лимфоцитов - локальная мышечная болезненность в области инъекций - общая гипертермия от субфибрильных цифр (чаще) до 39 градусов по Цельсию (редко) в день инъекции. Данные реакции, как правило, не требовали специального лечения, за исключением высокой гипертермии, когда однократно назначалась ацетилсолициловая кислота в дозе 0.5 г внутрь. Оценка эффективности индуцированного иммунного ответа против антигенов опухоли осуществляется по появлению гиперреакции замедленного типа при внутрикожном введении антигена, а также по появлению Т лимфоцитов продуцирующих интерферон-гамма в ответ на стимуляцию специфическим антигеном (тест ELISPOT) Преодоление иммуносупрессивных состояний, часто наблюдающихся у онкологических больных, оценивалось по восстановлению способности Т лимфоцитов пролиферировать в ответ на неспецифическую стимуляцию фитогемагглютинином. |
Вирусология
Иммунология
Самое популярное
Истории болезней
Таинственные силы кордицепсаВ 1994 году, на одном из международных соревнований по лёгкой атлетике, поражённые достижениями женской китайской сборной репортёры попытались узнать, какими сре...
Оказывается
Посторонний запах в микроволновке
Ремонт микроволновок – дело не простое. Не так легко и определить, нуждается ли ваш прибор в починке или мелкие неисправности не помешают работе печки еще долгие г...
Ремонт микроволновок – дело не простое. Не так легко и определить, нуждается ли ваш прибор в починке или мелкие неисправности не помешают работе печки еще долгие г...
На заметку
Преимущества лечения за рубежом
Поездки за границу для отдыха уже давно перестали быть чем-то необычным. Теперь это воспринимается как нечто вполне обыденное и нормальное. Но всё чаще люди начи...
Поездки за границу для отдыха уже давно перестали быть чем-то необычным. Теперь это воспринимается как нечто вполне обыденное и нормальное. Но всё чаще люди начи...